Hi-DNA လုံခြုံသောအပင်ပစ္စည်း

A-1 သည်နမူနာတွင်ဆဲလ်များ (သို့) ဗိုင်းရပ်စ်၏အာရုံစူးစိုက်မှုနည်းခြင်း၊ ဆဲလ်များ (သို့) ဗိုင်းရပ်စ်များ၏အာရုံစူးစိုက်မှုကိုတိုးတက်စေသည်။

A-2 နမူနာများလုံလောက်သောခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်း-နမူနာများသည် lysis ကြားခံနှင့်နှိုက်နှိုက်ချွတ်ချွတ်မရောနှောပါ။ ၎င်းကို pulse-vortexing ဖြင့် ၁-၂ ကြိမ်ရောစပ်ရန်အကြံပြုသည်။ - proteinase K. ၏လုပ်ဆောင်မှုကျဆင်းခြင်းကြောင့်ဖြစ်ရသောလုံလောက်သော cell lysis မလုံလောက်ခြင်း၊ ပူနွေးသောရေချိုးချိန်မလုံလောက်ခြင်းကြောင့် cell lysis မလုံလောက်ခြင်းသို့မဟုတ် protein ပျက်စီးခြင်း ၎င်းကိုတစ်သျှူးများကိုအပိုင်းပိုင်းလေးများ ဖြတ်၍ lysate ရှိအကြွင်းအကျန်များကိုဖယ်ရှားရန်ရေချိုးချိန်ကိုအကြံပြုသည်။

A-3 DNA စုပ်ယူမှုမလုံလောက်ခြင်း lysate လှည့်ပတ်ကော်လံသို့မလွှဲပြောင်းမီ ၁၀၀ ရာခိုင်နှုန်းအီသနော (သို့) ရာခိုင်နှုန်းနည်းမထည့်ပါ။

A-4 elution buffer ၏ pH တန်ဖိုးသည်အလွန်နည်းသည်။ -pH ကို ၈.၀ မှ ၈.၃ အတွင်းညှိပါ။

သန့်စင်ထားသောလက်ကျန်အီသနော

- သန့်ရှင်းလတ်ဆတ်သောအဝတ်လျှော်ကြားခံ PW တစ်ခုရှိသည်။ centrifuging spin column ကို ၃-၅ မိနစ်ထားပြီးဖယ်ရှားနိုင်ပြီးအခန်းအပူချိန် (သို့) ၅၀ 1-2 ၁-၂ မိနစ်ခန့်ထားနိုင်ပါသည်။

A-1 နမူနာသည်မလတ်ဆတ်ပါ။ - နမူနာတွင် DNA ပျက်ယွင်းမှုရှိမရှိဆုံးဖြတ်ရန်အပြုသဘောနမူနာ DNA ကိုထုတ်ယူပါ။

A-2 မမှန်ကန်သောကြိုတင်ကုသမှု။ - နိုက်ထရိုဂျင်အရည်ကြိတ်ခြင်း၊ အစိုဓာတ်ပြန်ရနိုင်ခြင်း (သို့) နမူနာပမာဏများလွန်းခြင်းကြောင့်ဖြစ်ရသည်။

ကြိုတင်ပြင်ဆင်မှုများသည်ကွဲပြားသောနမူနာများအတွက်ကွဲပြားသင့်သည်။ အပင်နမူနာများအတွက်နိုက်ထရိုဂျင်အရည်ဖြင့်သေချာစွာကြိတ်ပါ။ တိရစ္ဆာန်နမူနာများအတွက် homogenate (သို့) နိုက်ထရိုဂျင်အရည်ဖြင့်သေချာစွာကြိတ်ပါ။ G+ ဘက်တီးရီးယားများနှင့်တဆေးကဲ့သို့ချိုးရခက်သောဆဲလ်နံရံများရှိနမူနာများအတွက်ဆဲလ်နံရံများကိုချိုးဖျက်ရန် lysozyme, lyticase (သို့) စက်မှုနည်းလမ်းများကိုသုံးရန်အကြံပြုသည်။

4992201/4992202 Plant Genomic DNA Kit သည်ထုတ်ယူရန် chloroform လိုအပ်သောကော်လံအခြေပြုနည်းလမ်းကိုလက်ခံသည်။ ၎င်းသည်အမျိုးမျိုးသောအပင်နမူနာများအပြင်အပင်ခြောက်အမှုန့်များအတွက်အထူးသင့်တော်သည်။ Hi-DNAsecure Plant Kit သည်ကော်လံအခြေပြုသော်လည်း phenol/chloroform ထုတ်ယူမှုမလိုအပ်သဖြင့်၎င်းသည်အန္တရာယ်ကင်းပြီးအဆိပ်အတောက်ကင်းသည်။ ၎င်းသည် polysaccharides မြင့်မားစွာနှင့် polyphenol ပါဝင်သောအပင်များအတွက်သင့်တော်သည်။ ၄၉၉၂၇၀၉/၄၉၉၂၇၁၀ DNAquick Plant System သည်အရည်ကိုအခြေခံသည့်နည်းကိုသုံးသည်။ Phenol/chloroform ထုတ်ယူရန်လည်းမလိုအပ်ပါ။ သန့်ရှင်းရေးလုပ်ထုံးလုပ်နည်းသည်နမူနာစတင်ပမာဏအတွက်ကန့်သတ်ချက်မရှိဘဲရိုးရှင်းပြီးမြန်ဆန်သည်၊ ထို့ကြောင့်သုံးစွဲသူများသည်စမ်းသပ်လိုအပ်ချက်များအရပြောင်းလွယ်ပြင်လွယ်ပမာဏကိုချိန်ညှိနိုင်သည်။ gDNA အပိုင်းအစကြီးများကိုအထွက်နှုန်းမြင့်မားစွာရနိုင်သည်။

မျိုးရိုးဗီဇ DNA ကို TIANamp Blood DNA Kit မှလူ့သွေးနမူနာတစ်ခုလုံးမှကွဲပြားသောပမာဏများမှထုတ်ယူသည်။ ရလဒ်များမှာအောက်ပါအတိုင်းဖြစ်သည်။ ရလဒ်များကိုရည်ညွှန်းချက်အဖြစ်သာဖော်ပြထားပြီးအမှန်တကယ်ထုတ်ယူမှုရလဒ်များသည်နမူနာအခြေအနေများပေါ်တွင်မူတည်သည်။

သွေးခဲ DNA ကိုထုတ်ယူခြင်းသည်သွေးခဲ DNA ထုတ်ယူမှုအတွက်တိကျသောညွှန်ကြားချက်သို့ protocol ကိုပြောင်းခြင်းဖြင့်ဤဆေးသေတ္တာနှစ်ခုတွင်ပါ ၀ င်သော reagents များကိုသုံးနိုင်သည်။ တောင်းဆိုသောအခါသွေးခဲ DNA ထုတ်ယူမှုပရိုတိုကော၏ soft copy ကိုတောင်းခံနိုင်သည်။

လတ်ဆတ်သောနမူနာကို ၁ မီလီမီတာ PBS၊ ပုံမှန်ဆားရည်သို့မဟုတ် TE ကြားခံတို့ဖြင့်ရပ်ထားပါ။ နမူနာတစ်ခုအား homogenizer ဖြင့်လုံး ၀ ဖြစ်အောင်ပြီး centrifuging ဖြင့်ပြွန်၏အောက်ခြေသို့မိုးရွာသွန်းမှုကိုစုဆောင်းပါ။ supernatant ကိုဖယ်ရှားပြီးမိုးရေချိန်ကို 200 μl buffer GA ဖြင့်ပြန်လည်ရှင်သန်ပါ။ ညွှန်ကြားချက်အတိုင်းအောက်ပါ DNA သန့်စင်ခြင်းကိုလုပ်ဆောင်နိုင်သည်။

ပလာစမာ၊ သွေးရည်ကြည်နှင့်ခန္ဓာကိုယ်အရည်နမူနာများတွင် gDNA ကိုသန့်စင်ရန် TIANamp Micro DNA Kit ကိုအကြံပြုသည်။ သွေးရည်ကြည်/ပလာစမာနမူနာများမှဗိုင်းရပ်စ် gDNA ကိုသန့်စင်ရန် TIANamp Virus DNA/RNA Kit ကိုအကြံပြုသည်။ သွေးရည်ကြည်နှင့်ပလာစမာနမူနာများမှဘက်တီးရီးယား gDNA ကိုသန့်စင်ရန် TIANamp Bacteria DNA Kit (lysozyme ကို positive ဘက်တီးရီးယားအတွက်ထည့်သင့်သည်) ကိုအကြံပြုသည်။ တံတွေးနမူနာများအတွက် Hi-Swab DNA Kit နှင့် TIANamp Bacteria DNA Kit တို့ကိုအကြံပြုသည်။

DNA လုံခြုံသောအပင်အစုံ (သို့) DNAquick အပင်စနစ်သည်မှိုမျိုးဗီဇထုတ်ယူမှုအတွက်အကြံပြုသည်။ တဆေး၏မျိုးရိုးဗီဇထုတ်ယူမှုအတွက် TIANamp Yeast DNA Kit (lyticase ကိုကိုယ်တိုင်ပြင်ဆင်သင့်သည်) ကိုအကြံပြုသည်။