tissues တိရိစ္ဆာန်များအတွက်အကောင်းဆုံးကြားခံပစ္စည်းများသည်လုပ်ငန်းစဉ်ကိုရိုးရှင်းပြီးအဆင်ပြေစေသည်။
■ Unique DNase I သည် genomic DNA ညစ်ညမ်းမှုကိုအနည်းဆုံးဖြစ်စေသည်။
higher ပိုမိုသန့်ရှင်းစင်ကြယ်ပြီးအဆင်သင့်သုံးနိုင်သော RNA သည်ထိခိုက်လွယ်သောမြစ်အောက်ပိုင်းအသုံးချမှုများအတွက်သင့်တော်သည်။
phen လုပ်ငန်းစဉ်ကိုဘေးကင်းလုံခြုံစိတ်ချရသော CsCl gradients centrifugation မလိုအပ်ပါ။
■ RT-PCR
■ Northern Blot, Dot Blot ။
■အချိန်နှင့်တပြေးညီ PCR
Chip ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်း
■ PolyA Screening, in vitro translation, RNase အကာအကွယ်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းနှင့် molecular cloning
ထုတ်ကုန်အားလုံးသည် ODM/OEM အတွက်စိတ်ကြိုက်ပြုလုပ်နိုင်ပါသည်။ အသေးစိတ်အတွက်၊ကျေးဇူးပြုပြီး Customized Service (ODM/OEM) ကိုနှိပ်ပါ။
ပစ္စည်း - ၂၀ မီလီဂရမ်သန္ဓေသားလောင်း (၁၃ ရက်)၊ ကျောက်ကပ် ၁၅ မီလီဂရမ်၊ အသည်း ၁၀ မီလီဂရမ်၊ သရက်ရွက် ၁၅ မီလီဂရမ်၊ သိုင်းမား ၁၀ မီလီဂရမ်၊ အဆုတ် ၂၀ မီလီဂရမ် နည်းလမ်း - ကြွက်အသီးသီး၏တစ်သျှူးနမူနာများမှစုစုပေါင်း RNA ကို RNAprep Pure Tissue Kit သုံး၍ သန့်စင်ခဲ့သည်။ ရလဒ်များ - agarose gel electrophoresis ပုံကိုအထက်တွင်ပြထားသည်။ တစ်လမ်းသွားလျှင် 100 2l eluates 2-4 μlကိုတင်ခဲ့သည်။ M: TIANGEN DNA Marker III; Lane 1-2: သန္ဓေသားလောင်း (၁၃ ရက်) Lane 3: ကျောက်ကပ်; လမ်း 4-6: အသည်း; Lane 7: သရက်ရွက်; လမ်း ၈: Thymus; လမ်း ၉: အဆုတ်။ electrophoresis ကို 6 V/cm တွင်မိနစ် ၃၀ ကြာ 1% agarose gel ဖြင့်ပြုလုပ်သည်။ |
A-1 Cell lysis သို့မဟုတ် homogenization မလုံလောက်ပါ
---- နမူနာအသုံးပြုမှုကိုလျှော့ချပါ၊ lysis buffer ပမာဏကိုတိုးပါ၊ homogenization နှင့် lysis အချိန်ကိုတိုးမြှင့်ပါ။
A-2 နမူနာပမာဏသည်ကြီးလွန်းသည်
---- အသုံးပြုသောနမူနာပမာဏကိုလျှော့ချပါ (သို့) lysis ကြားခံပမာဏကိုတိုးပါ။
A-1 လုံလောက်သောဆဲလ်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်း (သို့) တသားတည်းဖြစ်စေခြင်း
---- နမူနာအသုံးပြုမှုကိုလျှော့ချပါ၊ lysis buffer ပမာဏကိုတိုးပါ၊ homogenization နှင့် lysis အချိန်ကိုတိုးမြှင့်ပါ။
A-2 နမူနာပမာဏသည်ကြီးလွန်းသည်
---- ကျေးဇူးပြု၍ အများဆုံးလုပ်ဆောင်နိုင်သောစွမ်းရည်ကိုကိုးကားပါ။
A-3 RNA ကိုကော်လံမှလုံးလုံးလျားလျားမဖျက်ပါ
---- RNase-free ရေထည့်ပြီးနောက် centrifuging မလုပ်မီမိနစ်အနည်းငယ်ထားပါ။
A-4 Ethanol ကိုထုတ်လုပ်သည်
---- ဆေးပြီးသောအခါ centrifuge ကိုတစ်ဖန်ပြန်ဆေးပြီးအတတ်နိုင်ဆုံးဖယ်ရှားပါ။
A-5 Cell culture medium သည်လုံးဝမဖယ်ရှားပါ
---- ဆဲလ်များကိုစုဆောင်းသောအခါယဉ်ကျေးမှုအလတ်စားကိုတတ်နိုင်သမျှဖယ်ရှားပါ။
A-6 RNAstore တွင်သိုလှောင်ထားသောဆဲလ်များကိုထိရောက်စွာ centrifuged မလုပ်ပါ
---- RNAstore သိပ်သည်းဆသည်ပျမ်းမျှဆဲလ်ယဉ်ကျေးမှုအလယ်အလတ်ထက်ပိုကြီးသည်။ ထို့ကြောင့် centrifugal force ကိုတိုးသင့်သည်။ ၎င်းသည် 3000x g တွင် centrifuge ကိုအသုံးပြုရန်အကြံပြုသည်။
A-7 နမူနာ၌ RNA ပါဝင်မှုနည်းပါးခြင်းနှင့်ကြွယ်ဝခြင်း
---- အထွက်နှုန်းနိမ့်သည်ကိုနမူနာအားဖြင့်ဆုံးဖြတ်ရန်အပြုသဘောနမူနာကိုသုံးပါ။
A-1 ပစ္စည်းသည်မလတ်ဆတ်ပါ
---- လတ်ဆတ်သောတစ်သျှူးများကိုအရည်နိုက်ထရိုဂျင်တွင်ချက်ချင်းသိုလှောင်ခြင်းသို့မဟုတ်ထုတ်ယူခြင်းအကျိုးသက်ရောက်မှုကိုသေချာစေရန် RNAstore reagent ထဲသို့ချက်ချင်းထည့်ထားသင့်သည်။
A-2 နမူနာပမာဏသည်ကြီးလွန်းသည်
---- နမူနာပမာဏကိုလျှော့ချပါ။
A-3 RNase ညစ်ညမ်းမှုn
---- ကိရိယာတွင်ပေးထားသောကြားခံသည် RNase မပါ ၀ င်သော်လည်း၎င်းသည်ထုတ်ယူခြင်းလုပ်ငန်းစဉ်အတွင်း RNase ကိုညစ်ညမ်းရန်လွယ်ကူပြီးဂရုတစိုက်ကိုင်တွယ်သင့်သည်။
A-4 Electrophoresis ညစ်ညမ်းမှု
---- electrophoresis buffer ကိုအစားထိုးပြီးလူသုံးနှင့် Loading Buffer သည် RNase ညစ်ညမ်းမှုမရှိကြောင်းသေချာပါစေ။
A-5 electrophoresis အတွက်တင်ရာတွင်အလွန်များနေသည်
---- နမူနာတင်သောပမာဏကိုလျှော့ချပါ၊ ရေတွင်းတစ်ခုစီ၏သယ်ယူပို့ဆောင်ရေးသည် 2 μgထက်မပိုသင့်ပါ။
A-1 နမူနာပမာဏသည်ကြီးလွန်းသည်
---- နမူနာပမာဏကိုလျှော့ချပါ။
A-2 နမူနာအချို့တွင် DNA မြင့်မားမှုရှိပြီး DNase ဖြင့်ကုသနိုင်သည်။
---- RNase-Free DNase ကုသမှုကိုရရှိသော RNA solution သို့ RNA ကိုကုသမှုပြီးနောက်နောက်ဆက်တွဲစမ်းသပ်မှုများအတွက်တိုက်ရိုက်သုံးနိုင်သည်၊ သို့မဟုတ် RNA သန့်စင်ပစ္စည်းများဖြင့်ထပ်မံသန့်စင်နိုင်သည်။
ဖန်ခွက်များအတွက် ၁၅၀ ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်တွင် ၄ နာရီကြာဖုတ်ပါ။ ပလတ်စတစ်ကွန်တိန်နာများအတွက် 0.5 M NaOH တွင် ၁၀ မိနစ်နှစ်မြှုပ်ပါ၊ ထို့နောက် RNase- ကင်းစင်သောရေဖြင့်သေချာစွာဆေးပြီးမှ RNase ကိုဖယ်ရှားရန်ပိုးသတ်ပါ။ စမ်းသပ်မှုတွင်သုံးသောဓာတ်ကူပစ္စည်းများ (သို့) အဖြေများ၊ အထူးသဖြင့်ရေသည် RNase ကင်းစင်ရမည်။ ဓာတ်ကူပြင်ဆင်မှုအားလုံးအတွက် RNase- ကင်းစင်သောရေကိုသုံးပါ။ (သန့်ရှင်းသောဖန်ပုလင်းထဲသို့ရေထည့်ပါ၊ DEPC ကိုနောက်ဆုံး ၀.၁% (V/V) နောက်ဆုံးအာရုံစူးစိုက်မှု၊ တစ်ချိူ့နှင့် autoclave ထည့်ပါ။
စတင်တည်ထောင်ကတည်းကကျွန်ုပ်တို့၏စက်ရုံသည်နိယာမကိုလိုက်နာခြင်းဖြင့်ပထမကမ္ဘာအဆင့်ထုတ်ကုန်များကိုတီထွင်ခဲ့သည်
အရည်အသွေးပထမ ကျွန်ုပ်တို့၏ထုတ်ကုန်များသည်စက်မှုလုပ်ငန်းတွင်အလွန်နာမည်ကောင်းရခဲ့ပြီးဖောက်သည်အသစ်နှင့်အဟောင်းများကြားတွင်အဖိုးတန်လက်ဖွဲ့ပစ္စည်းများဖြစ်သည်။